Die HPLC (engl. high performance liquid chromatography) ist besonders in der Biochemie ein wichtiges Werkzeug bei der Analyse und Präparation von Stoffen mit hohen Molekulargewichten, wie etwa Proteinen. Dank der unterschiedlichen Trennprinzipien und Detektoren können selbst Gemische aus Aminosäuren, Enzymen und anderen Biopolymeren erfolgreich identifiziert werden. Auch für präparative Trennungen zur Darstellung von Stoffen aus Gemischen ist die HPLC geeignet, vorausgesetzt die Säulen sind entsprechend dimensioniert.
Im Prinzip ist die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie eine technisch optimierte Säulenchromatographie, bei der eine Pumpe den Eluenten kontinuierlich mit 50 bis 400 bar durch die Säule drückt. Beim Durchlaufen der Säule wird die injizierte Probe aufgetrennt und der nachgeschaltete Detektor misst ein zur eluierten Menge proportionales Signal, das letztendlich in das sogenannte Chromatogramm umgewandelt wird.
Wie die Flüssigkeitschromatographie im Detail funktioniert, wo sie zur Anwendung kommt und welche Detektoren heute gebräuchlich sind, erfahren Sie in unserem Magazinartikel „HPLC – Eine Methode für die biochemische Forschung“.
Veröffentlichungen
Labo: Wie funktioniert die HPLC?
GIT Laborportal: HPLC – Eine Methode für die Biochemische Forschung
